黃桿菌肝素酶Ⅱ重組菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化及高密度發(fā)酵
發(fā)布時(shí)間：2015-09-07
【作者】 周斌； 程詠梅； 鄧超； 劉衛(wèi)超； 陳潮梁； 陳敬華； 許正宏；
生物工程學(xué)報(bào) , Chinese Journal of Biotechnology,
2014年04期
【機(jī)構(gòu)】 江南大學(xué)藥學(xué)院； 江南大學(xué)無錫醫(yī)學(xué)院；
【摘要】 黃桿菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)是一類可特異性切割肝素、硫酸乙酰肝素類分子內(nèi)連接鍵的酶。文中對黃桿菌肝素酶Ⅱ重組菌的誘導(dǎo)時(shí)機(jī)、誘導(dǎo)劑添加量、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)時(shí)間等誘導(dǎo)產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)過優(yōu)化最佳搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶條件為:37℃培養(yǎng)重組菌至對數(shù)生長前期,添加誘導(dǎo)劑IPTG至終濃度為0.3 g/L,20℃下誘導(dǎo)10 h,酶活達(dá)到最高,為570 U/L。在此基礎(chǔ)上通過發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)手段將菌體濃度OD600進(jìn)一步提高到98,酶活大幅度提高到9 436 U/L,該研究結(jié)果為HepⅡ的工業(yè)化生產(chǎn)與應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。